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豬白細(xì)胞介素-10(IL-10)實(shí)驗(yàn)原理 ELISA檢測報(bào)價(jià)

2013-08-16 [1091]

豬白細(xì)胞介素-10(IL-10)實(shí)驗(yàn)原理 ELISA檢測報(bào)價(jià)
我公司產(chǎn)品種類多,貨期快,價(jià)格好,并提供實(shí)驗(yàn)代測服務(wù),我們將以專業(yè)執(zhí)著,精益求精的精神服務(wù)于廣大科研用戶。
試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定豬血清,血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素-10(IL-10)含量。
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬白細(xì)胞介素10(IL-10)水平。用純化的豬白細(xì)胞介素10抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素10,再與HRP標(biāo)記的羊抗豬抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的IL-10呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬白細(xì)胞介素10(IL-10)濃度。
試劑盒組成:

試劑盒組成
48孔配置
96孔配置
保存
說明書
1份
1份
 
封板膜
2片(48)
2片(96)
 
密封袋
1個(gè)
1個(gè)
 
酶標(biāo)包被板
1×48
1×96
2-8保存
標(biāo)準(zhǔn)品:180ng/L
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
2-8保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2-8
酶標(biāo)試劑
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
樣品稀釋液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
顯色劑A液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
顯色劑B液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
終止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8保存
濃縮洗滌液
(20ml×20倍)×1瓶
(20ml×30倍)×1瓶
2-8保存

豬白細(xì)胞介素-10(IL-10)樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

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